『メリーに首ったけ』や『ミート・ザ・ペアレンツ』『ズーランダー』などの作品で知られるベン・スティラー主演による大ヒットシリーズの3作目となる本作。
失業中でバツイチの主人公が愛する息子の信頼を取り戻すためにニューヨーク自然史博物館の夜警として働くことになるのだが、夜になると骨だけのティラノサウルスや、剥製の動物たち、ローマ帝国や西部開拓時代のミニチュア人形といった展示物が動き出して…という1作目から、手違いでスミソニアン博物館群に運ばれた魔法の石板を追ってワシントンD.C.に向かったラリーの活躍を描く2作目に続き、本作ではロンドンの大英博物館が舞台となる。
博物館の展示物たちを動かしていたエジプト王の石版の魔力が消えかかり、博物館の仲間たちが2度と動けなくなるのを恐れたラリーは、石版の謎を解く鍵が大英博物館にあると知り、仲間たちや息子ニッキーを連れてロンドンへ。
ロンドンの街中でのチェイスにトリケラトプスとの死闘など、過去と現在、世界各地を股にかけながら、シリーズ最大の謎がついに暴かれる――というストーリー。
ラリー役のベン・スティラーをはじめ、本作が実写作品としては遺作となったロビン・ウィリアムズ、『ボヘミアン・ラプソディ』でアカデミー賞主演男優賞を受賞したラミ・マレックらが出演。
日本語吹き替え版ではベン・スティラー役の堀内賢雄、ロビン・ウィリアムズ役の岩崎ひろしをはじめ、レベル・ウィルソンの声優に「カンナさーん！」などで女優としても活動、インスタグラマーとしても日本トップクラスのフォロワー数を誇る渡辺直美を迎えるなど豪華なメンバーが共演している。
金曜ロードSHOW！『ナイト ミュージアム／エジプト王の秘密』は11月1日（金）21時～日本テレビ系でオンエア。
